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信号通路
英文名称: Staphylococcus aureus protein A (SPA) ELISA Kit
别名: SPA
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.25-2000pg/mL
灵敏度: 16.8pg/mL
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆和细胞培养上清
隐藏域元素占位
详细信息
简介
金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)是一种从金黄色葡萄球菌细胞壁分离的蛋白质。它是细胞壁抗原的主要成分,几乎90%以上的菌株均含有这种成分,但不同的菌株含量差别十分悬殊。SPA占整个细胞壁蛋白成分的6.7%,通过胞壁肽聚糖以共价键与之结合。其它葡萄球菌如表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌不含SPA。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中的SPA, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.25
0
OD值
2.67
1.7
0.97
0.56
0.31
0.2
0.14
0.07
校正OD 值
2.58
1.61
0.88
0.47
0.11
0.11
0.05
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的SPA , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.0-101.6
96.50
血浆(n=8)
92.7-106.5
102.70
细胞培养上清(n=8)
97.3-108.1
105.80
线性稀释:分别在选取的4份健康血清血浆细胞培养上清中加入高浓度SPA , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.8-95.3
91.60
87.2-96.9
92.20
90.6-110.1
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.0-104.1
93.60
87.6-108.5
98.20
105.8-115.7
110.90
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