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信号通路
英文名称: Reactive Oxygen Species (ROS) Detection Fluorometric Assay Kit (Green Fluorescence)
别名: 活性氧,Reactive Oxygen Species ,ROS
保存温度: -20℃
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详细信息
简介
正式检测前,建议选择 2-3 个预期差异较大的样本进行预实验。
• 阳性对照推荐初始使用浓度为 1:10,000(推荐 1:10,000-1:100,000 稀释,具体依细胞类型而定)。通常刺激后 15 min-4 h 可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞,活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后 30 min 内观察不到活性氧的升高,可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果荧光信号过强,可适当降低活性氧阳性对照的浓度。
• 实验过程中,如果阴性对照细胞荧光也比较强,可以按照 1:2,000-1:5,000 稀释荧光探针 DCFH-DA,使DCFH-DA 的终浓度为 2-5 μM。探针装载的时间可在 15-60 min 内适当进行调整,尽量缩短读片时的曝光时间,并且对照组、实验组曝光时间需保持一致。
• RosUP 仅用于作为阳性对照的样品,并非所有试验组样品中都需加入活性氧阳性对照。
• 探针装载后,一定要洗净未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。
• 尽量缩短探针装载后到检测所用的时间(刺激时间除外),以减少各种可能的误差。
• 生化检测试剂普遍具有刺激性、生物毒性等,为了您的安全和健康,请在实验全程做好生物安全防护,穿戴实验服、口罩、手套、头套等安全护具,在通风橱、生物安全柜中进行实验。
• 本产品仅供科学研究使用,不适用于临床诊断。
实验原理
活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)是氧正常代谢的天然副产物,在细胞信号传导和体内平衡中起重要作用。但是,在氧化应激相关状态下,ROS水平可以大大增加。 ROS的积累会严重破坏细胞结构。氧化应激在心血管疾病,糖尿病,骨质疏松症,中风,炎症性疾病,以及神经退行性疾病和癌症的研究发挥重要的作用。ROS检测将有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。
特异性
可检测样本中的活性氧,Reactive Oxygen Species ,ROS, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度
OD值
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康中加入 3 个不同浓度水平的活性氧,Reactive Oxygen Species ,ROS , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
(n=8)
(n=8)
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康中加入高浓度活性氧,Reactive Oxygen Species ,ROS , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
1:02
范围
平均回收率
1:04
范围
平均回收率
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