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信号通路
英文名称: Micro Mitochondrial Isocitrate Dehydrogenase(ICDHm)Activity Assay Kit
别名: 异柠檬酸脱氢酶,ICDHm
实验类型: 比色法
隐藏域元素占位
详细信息
简介
• 测定管的 ΔA应在0.01-0.3之间,若测定管的ΔA大于0.3,需将样本进行稀释。
•不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用;否则,可能导致结果异常。
•混合或复溶组分时,避免产生气泡。
•勤换吸头,避免各组分之间的交叉污染。
•实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。
•测定过程中样本和所有试剂在冰上放置,以免变性和失活。
•因通过单位时间内吸光值变化计算酶活,不推荐同时测多个样本。
•推荐使用样本蛋白浓度计算酶活,若用样本质量计算,则需加测胞浆提取物酶活,上清和沉淀酶活之和方为总酶活。
•尽量用新鲜样本提取ICDHm,以保证样本酶的活力。
•如果吸光度太高,可以减少组织质量,如果吸光度太低,可以减少Extraction Buffer体积。
实验原理
线粒体异柠檬酸脱氢酶(ICDHm)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中,在三羧酸循环中异柠檬酸脱氢酶可以催化异柠檬酸脱羧生成α-酮戊二酸,同时将NADP+还原为NADPH。
特异性
可检测样本中的异柠檬酸脱氢酶,ICDHm, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度
OD值
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康中加入 3 个不同浓度水平的异柠檬酸脱氢酶,ICDHm , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
(n=8)
(n=8)
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康中加入高浓度异柠檬酸脱氢酶,ICDHm , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
1:02
范围
平均回收率
1:04
范围
平均回收率
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