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信号通路
英文名称: Micro Phosphoenolpyruvate (PEP) Content Assay Kit
别名: 磷酸烯醇式丙酮酸(PEP),Phosphoenolpyruvate (PEP) Content
实验类型: 比色法
检测范围: 10-1000 nmol/mL
灵敏度: 10 nmol/mL
保存温度: 4℃
样本类型: 动植物组织、细胞、血清(浆)或其他液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
•推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。
•实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。
实验原理
磷酸烯醇式丙酮酸(Phosphoenolpyruvate, PEP)是生物体内一种关键的代谢中间产物,它在糖酵解、糖异 生以及芳香族氨基酸合成等关键代谢途径中,扮演着不可或缺的角色,对维持细胞能量代谢与物质合成平衡至 关重要。 本试剂盒检测原理是样本中的PEP 在丙酮酸激酶(PK)的催化下,与腺苷二磷酸(ADP)发生转磷酸反 应,生成丙酮酸与腺苷三磷酸(ATP);随后,丙酮酸在丙酮酸氧化酶的作用下被氧化,同时伴随黄素腺嘌呤 二核苷酸(FAD)的还原,产生还原型黄素腺嘌呤二核苷酸(FADH2);生成的FADH2 进一步被氧化重新生 成FAD 并释放过氧化氢(H2O2);最终,在过氧化物酶的催化体系中,H2O2 与4-氨基安替比林(4-AAP)、 N-乙基-N-(2-羟基-3-丙磺基)-3-甲基苯胺(TOOS)发生偶联显色反应,生成稳定的红色醌亚胺类化合物。通 过检测554 nm 的吸光度值,即可计算样本中PEP 的含量。
特异性
可检测样本中的磷酸烯醇式丙酮酸(PEP),Phosphoenolpyruvate (PEP) Content, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度
OD值
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康中加入 3 个不同浓度水平的磷酸烯醇式丙酮酸(PEP),Phosphoenolpyruvate (PEP) Content , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
(n=8)
(n=8)
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康中加入高浓度磷酸烯醇式丙酮酸(PEP),Phosphoenolpyruvate (PEP) Content , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
1:02
范围
平均回收率
1:04
范围
平均回收率
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