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信号通路
英文名称: Micro Pyruvate Phosphate Dikinase (PPDK) Activity Assay Kit
别名: 丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)
实验类型: 比色法
保存温度: -20℃
隐藏域元素占位
详细信息
简介
•推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。
•实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。
实验原理
丙酮酸磷酸双激酶(pyruvate phosphate dikinase, PPDK, EC 2.7.9.1)是 C4 途径和景天科酸代谢途径的限速酶,催化 ATP、丙酮酸和 Pi 经三步反应生成磷酸烯醇式丙酮酸。该酶主要存在于 C4 植物的叶绿体基质中,对光合功能具有重要调节作用。CheKine™ 丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)活性检测试剂盒(微量法)提供了一种简单、方便、快速的 PPDK 活性检测方法,适用于植物组织样本。其原理是 PPDK 的逆向反应催化磷酸烯醇式丙酮酸、AMP 和 PPi 生成丙酮酸、ATP 和 Pi,乳酸脱氢酶进一步催化丙酮酸和 NADH 生成乳酸和 NAD+,在 340 nm 测定 NADH 减少速率,计算 PPDK 活性。
特异性
可检测样本中的丙酮酸磷酸双激酶(PPDK), 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度
OD值
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康中加入 3 个不同浓度水平的丙酮酸磷酸双激酶(PPDK) , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
(n=8)
(n=8)
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康中加入高浓度丙酮酸磷酸双激酶(PPDK) , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
1:02
范围
平均回收率
1:04
范围
平均回收率
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