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信号通路
英文名称: Mouse Endotoxin(ET)ELISA Kit
别名: ET
实验类型: 竞争法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.076ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
内毒素(ET)也称为脂多糖 (LPS),是革兰氏阴性菌(如大肠杆菌和沙门氏菌)细胞包膜最外层膜成分的统称,具有共同的结构结构。脂多糖是由三部分组成的大分子:称为 O 抗原的外核多糖、内核低聚糖和脂质 A(毒性主要来源),均共价连接。在目前的术语中,术语内毒素通常与 LPS 同义,尽管有一些内毒素(最初意义上的细菌细胞内部的毒素,当细胞分解时释放)与 LPS 无关,例如苏云金芽孢杆菌产生的所谓 δ 内毒素蛋白。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠内毒素(ET)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠内毒素(ET)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的ET, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
0.19
0.24
0.31
0.55
0.97
1.38
1.96
2.52
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠ET , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.2-101.5
96.70
血浆(n=8)
92.2-105.7
101.10
细胞培养上清(n=8)
97.7-108.6
105.10
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠ET , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.6-95.0
91.90
88.8-96.1
93.40
90.9-110.9
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.4-104.0
93.40
87.1-108.3
98.10
105.3-115.1
110.30
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