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信号通路
英文名称: 25-Hydroxyvitamin D3 (25(OH)D3)
别名: 25(OH)D3
实验类型: 竞争法
检测范围: 0.78-50ng/mL
灵敏度: 0.33ng/mL
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
25羟基维生素D3(25(OH)D3)又称骨化二醇，钙化醇或25-羟基胆钙化醇，是维生素D25-羟化酶对维生素D3（胆钙化醇）进行羟化而在肝脏中产生的一种维生素D形式。它可由25(OH)D-1α-羟化酶进一步羟化，主要在肾脏，形成钙三醇（1,25-(OH)2D3），这是维生素D的活性激素形式。它在血液中被维生素D结合蛋白强烈结合。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有25羟基维生素D3(25(OH)D3)抗原的微孔中，依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的25羟基维生素D3(25(OH)D3)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中的25(OH)D3, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
500
250
125
62.5
31.25
15.62
7.81
0
OD值
0.216
0.298
0.417
0.669
0.955
1.405
1.79
1.865
校正OD 值
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的25(OH)D3 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
81.8-102.9
96.30
血浆(n=8)
92.6-106.9
102.40
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康血清血浆中加入高浓度25(OH)D3 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
83.2-96.7
92.60
88.4-96.4
93.10
1:04
范围
平均回收率
89.7-104.4
93.90
87.7-108.4
98.90
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