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信号通路
英文名称: Fish Follicle Stimulating Hormone (FSH) ELISA KIT
别名: FSH
实验类型: 竞争法
检测范围: 1.56-100mIU/mL
灵敏度: 0.58mIU/mL
种属: 鱼
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
卵泡刺激素(FSH)是一种促性腺激素,也是一种糖蛋白多肽激素。FSH由垂体前叶的促性腺激素细胞合成和分泌,它和黄体生成素(LH)在生殖系统中共同发挥作用。FSH是一个35.5 kDa的糖蛋白异构体,由两个多肽单元组成,即α和β。其结构与黄体生成素(LH)、促甲状腺激素(TSH)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)的结构相似。LH、FSH、TSH和hCG糖蛋白的α亚单位是相同的,由96个氨基酸组成,而β亚单位则不同。这两个亚单位都是生物活性所必需的。FSH有一个111个氨基酸的β亚单位(FSH β),赋予其特定的生物作用,并负责与卵泡刺激素受体相互作用。激素的糖类部分与天冬酰胺共价键合,由N-乙酰半乳糖胺、甘露糖、N-乙酰葡萄糖胺、半乳糖和唾液酸组成。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有鱼促卵泡素(FSH) 抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的鱼促卵泡素(FSH) 呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中鱼的FSH, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度mIU/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
0.19
0.24
0.31
0.55
0.97
1.38
1.96
2.52
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康鱼血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的鱼FSH , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.5-102.1
97.20
血浆(n=8)
92.5-105.0
101.90
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康鱼血清血浆中加入高浓度鱼FSH , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
83.2-95.8
91.90
88.1-97.2
94.90
1:04
范围
平均回收率
89.8-104.7
93.40
87.3-108.9
98.50
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