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信号通路
英文名称: Human Platelet Activating Factor (PAF) ELISA Kit
别名: PAF
实验类型: 竞争法
检测范围: 46.87-3000pg/mL
灵敏度: 23pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
血小板活化因子,又称 PAF、PAF-acether 或 AGEPC(乙酰甘油醚-磷酰胆碱),是一种有效的磷脂激活剂和许多白细胞功能、血小板聚集和脱颗粒、炎症和过敏性休克的媒介。它还参与血管通透性的变化、氧化爆发、白细胞的趋化以及吞噬细胞中花生四烯酸代谢的增强。PAF 由多种细胞产生,但特别是那些参与宿主防御的细胞,如血小板、内皮细胞、中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞。PAF 由这些细胞持续产生,但数量不多,其产生受 PAF 乙酰水解酶的活性控制。炎症细胞在特定的刺激下会产生大量的 PAF。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人血小板活化因子(PAF)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人血小板活化因子(PAF)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PAF, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
3000
1500
750
375
187.5
93.75
46.87
0
OD值
0.19
0.24
0.31
0.55
0.97
1.38
1.96
2.52
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的人PAF , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.0-101.8
96.80
血浆(n=8)
92.8-105.1
101.50
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆中加入高浓度人PAF , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
83.8-95.6
91.10
88.2-96.4
93.80
1:04
范围
平均回收率
89.9-104.2
93.30
87.3-108.8
98.20
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