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信号通路
英文名称: Human Alkaline Phosphatase (ALP) ELISA Kit
别名: ALP
实验类型: 竞争法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.1ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
碱性磷酸酶(ALP, ALKP, ALPase, Alk Phos),或称碱性磷酸酶,是一种86千道尔顿的同源蛋白酶。每个单体含有五个半胱氨酸残基、两个锌原子和一个镁原子,对其催化功能至关重要,它在碱性pH环境下具有最佳的活性。ALP具有去磷酸化化合物的生理作用。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人碱性磷酸酶(ALP)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人碱性磷酸酶(ALP)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的ALP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.15
0
OD值
0.188
0.27
0.389
0.642
0.929
1.38
1.766
1.842
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的人ALP , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-101.5
96.70
血浆(n=8)
92.2-105.7
102.80
组织匀浆(n=8)
96.7-109.0
105.80
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆组织匀浆中加入高浓度人ALP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.7
91.40
88.2-96.0
93.20
90.4-110.5
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.4
94.10
87.5-108.1
98.70
105.5-115.4
108.70
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