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信号通路
英文名称: Human Cyclic Guanosine Monophosphate (cGMP) ELISA Kit
别名: cGMP
实验类型: 竞争法
检测范围: 0.78-50ng/mL
灵敏度: 0.51ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
环磷酸鸟苷(cGMP)是一种环状核苷酸,来源于三磷酸鸟苷(GTP)。它最可能的作用机制是激活细胞内的蛋白激酶,以应对膜渗透性肽类激素与细胞外表面的结合。鸟苷酸环化酶(GC)催化 cGMP 的合成。这种酶将 GTP 转换为 cGMP。肽类激素,如心房钠尿素激活膜结合的 GC,而可溶性 GC( sGC ) 通常被一氧化氮激活以刺激 cGMP 的合成。sGC 可被 ODQ(1H-[1,2,4]噁二唑并[4,3-a]喹喔啉-1-酮)抑制。cGMP 是离子通道传导性、糖原分解和细胞凋亡的常见调节剂。它还能放松平滑肌组织。在血管中,血管平滑肌的放松导致血管扩张和血流量增加。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人环磷酸鸟苷(cGMP)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人环磷酸鸟苷(cGMP)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的cGMP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0.78
0
OD值
0.26
0.36
0.49
0.72
1.04
1.3
1.6
2.09
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人cGMP , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.0-101.9
96.70
血浆(n=8)
92.7-105.4
101.80
细胞培养上清(n=8)
97.7-108.0
105.10
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人cGMP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.3-95.7
91.10
88.3-96.8
93.30
90.1-110.1
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.7-104.6
93.50
87.8-108.2
98.10
105.3-115.3
110.20
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