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信号通路
英文名称: Human Thyrotropin Releasing Hormone (TRH) ELISA Kit
别名: TRH
实验类型: 竞争法
检测范围: 7.8-500pg/mL
灵敏度: 3.7pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
促甲状腺素释放激素(TRH)是一种由下丘脑的神经元产生的促下丘脑激素, 可刺激垂体前叶释放促甲状腺激素(TSH)和催乳素。它被翻译成 242 个氨基酸的前体多肽,其中包含 6 份序列-Gln-His-Pro-Gly-,两侧是 Lys-Arg 或 Arg-Arg 序列。室旁核的 TRH 合成神经元投射到正中突起外层的内侧部分。在正中隆起分泌后,它通过下丘脑门系统到达垂体前叶,在那里与 TRH 受体结合,刺激甲状腺刺激素和泌乳素的释放。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人促甲状腺素释放激素(TRH)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人促甲状腺素释放激素(TRH)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的TRH, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
500
250
125
62.5
31.2
15.6
7.8
0
OD值
0.188
0.27
0.389
0.642
0.929
1.38
1.766
1.842
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人TRH , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.9-101.0
96.90
血浆(n=8)
92.3-105.8
101.70
细胞培养上清(n=8)
97.2-108.0
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人TRH , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.6-95.8
91.20
88.5-96.9
93.60
90.2-110.2
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.6-104.3
93.50
87.6-108.0
98.50
105.4-115.2
110.10
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