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信号通路
英文名称: Human Procollagen III N-Terminal Propeptide (PIIINP) ELISA Kit
别名: PⅢNP
实验类型: 竞争法
检测范围: 62.5-4000pg/mL
灵敏度: 25.38pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)是在III型胶原蛋白的合成过程中产生。肝脏结缔组织中的主要胶原蛋白是I型和III型。如果由于病理情况,肝脏中的结缔组织积极增生(纤维化),就会形成越来越多的原胶原蛋白III N端肽。功能性肝脏组织向结缔组织的转化可以通过提高血液中原胶原蛋白III N端肽的水平来检测。因此,血清中的PIIINP可以作为肝脏纤维化和肝硬化的一个指标来测量。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PⅢNP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
4000
2000
1000
500
250
125
62.5
0
OD值
0.188
0.27
0.389
0.642
0.929
1.38
1.766
1.842
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人PⅢNP , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.2-101.4
97.20
血浆(n=8)
92.9-105.3
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.6-108.2
105.30
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人PⅢNP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.1
91.60
88.5-96.9
93.70
92.7-110.7
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.9
94.70
87.4-108.0
99.50
105.8-115.6
108.70
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