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信号通路
英文名称: Human 25-Hydroxyvitamin D2 (25(OH)D2) ELISA Kit
别名: 25(OH)D2
实验类型: 竞争法
检测范围: 3.12-200ng/mL
灵敏度: 1.6ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
25羟维生素D是维生素D在体内的主要存在形式。维生素D为类固醇衍生物，属脂溶性维生素，为环戊烷多氢菲类化合物。在体内有两种形式的维生素D，维生素D3（胆钙化醇）和维生素D2（麦角钙化醇），维生素D在肝脏中通过羟基化作用转化成25-羟基维生素D（25-OH-VD），然后在肾脏中转换为具有活性的1,25-二羟基维生素D。25-羟基维生素 D2 是一种羟基钙，即维生素D2，其中第 25 位的氢已被一个羟基取代。它具有保护骨密度的作用。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人25羟基维生素D2(25(OH)D2)抗原的微孔中，依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人25羟基维生素D2(25(OH)D2)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的25(OH)D2, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
0.216
0.298
0.417
0.669
0.955
1.405
1.79
1.865
校正OD 值
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人25(OH)D2 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
81.4-101.0
96.70
血浆(n=8)
92.3-105.7
101.80
细胞培养上清(n=8)
97.0-108.7
105.80
线性稀释：分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人25(OH)D2 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.7-95.6
91.10
88.3-96.3
93.10
90.0-110.5
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.8-104.5
93.70
87.0-108.8
98.80
105.1-115.9
110.80
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