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信号通路
英文名称: Human 25-Hydroxy Vitamin D (25-OH-VD) ELISA Kit
别名: 25-OH-VD
实验类型: 竞争法
检测范围: 3.12-200ng/mL
灵敏度: 1.5ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、细胞培养上清
隐藏域元素占位
详细信息
简介
25 羟维生素 D(25-OH-VD)是维生素 D 在体内的主要存在形式。维生素 D 主要通过日照条件下皮肤合成,少部分可经饮食获得。维生素 D 为类固醇衍 生物,属脂溶性维生素,为环戊烷多氢菲类化合物。维生素 D 不仅仅影响钙 磷代谢,而且具有广泛的生理作用,是维持细胞生长和发育的必不可少的物 质,与多种疾病密切相关。维生素 D 在肝脏中通过羟基化作用转化成 25-羟 基维生素 D(25-OH-VD),然后在肾脏中转换为具有活性的 1,25-二羟基 维生素 D
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人25羟基维生素D(25-OH-VD)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人25羟基维生素D(25-OH-VD)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的25-OH-VD, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
0.188
0.27
0.389
0.642
0.929
1.38
1.766
1.842
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人25-OH-VD , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.7-101.0
96.90
血浆(n=8)
92.6-105.3
101.90
细胞培养上清(n=8)
97.8-108.6
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人25-OH-VD , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.4-95.6
91.40
88.4-96.4
93.70
90.8-110.0
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.1-104.6
93.90
87.0-108.3
98.50
105.9-115.2
110.60
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