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信号通路
英文名称: Mouse acylated ghrelin (AG) ELISA Kit
别名: AG
实验类型: 竞争法
检测范围: 78-5000pg/mL
灵敏度: 38.8pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液及其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
酰基化饥饿素(AG)是由胃肠道,特别是胃的肠内分泌细胞产生的一种激素, 通常被称为 "饥饿激素",因为它增加了进食的动力。AG是胃黏膜分泌的28氨基酸多肽激素,通过第3位丝氨酸的辛酰基修饰激活,是唯一已知的胃肠道促食欲激素。只有AG能特异性结合生长激素促分泌受体(GHSR-1a),激活下游信号通路。刺激生长激素释放、促进摄食行为,参与能量稳态平衡。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠酰基化饥饿素(AG)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠酰基化饥饿素(AG)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的AG, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
5000
2500
1250
625
312
156
78
0
OD值
0.216
0.298
0.417
0.669
0.955
1.405
1.79
1.865
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠AG , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.6-101.9
96.90
血浆(n=8)
92.8-105.4
101.50
细胞培养上清(n=8)
97.9-108.6
104.40
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠AG , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.3-95.2
91.80
88.8-96.5
93.40
90.9-110.3
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.1-104.9
93.80
87.9-108.5
98.20
105.3-115.9
110.10
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