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信号通路
英文名称: Mouse Trypsinogen Activation Peptide (TAP) ELISA Kit
别名: TAP
实验类型: 竞争法
检测范围: 15.6-1000pg/mL
灵敏度: 6.2pg/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
胰蛋白酶原激活肽(TAP)是胰蛋白酶原的裂解产物,随着酶原颗粒的激活释放到系统循环中。由于其分子量低,TAP 在尿液中迅速排泄,在尿液和血清中都容易检测到。同样,羧肽酶 B 激活肽(CAPAP)是原羧肽酶 B 的一个多肽片段,原羧肽酶 B 是胰岛细胞中的一种大型细胞膜蛋白。TAP 和 CAPAP 都是随着蛋白酶的激活而释放的。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的TAP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
0.216
0.298
0.417
0.669
0.955
1.405
1.79
1.865
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠TAP , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.9-101.2
96.60
血浆(n=8)
92.6-105.4
101.20
细胞培养上清(n=8)
97.7-108.2
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠TAP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.2-95.9
91.20
88.3-96.7
93.90
90.8-110.6
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.1-104.2
93.70
87.4-108.3
98.90
105.2-115.1
110.10
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