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信号通路
英文名称: Mouse secretory immunoglobulin A (sIgA) ELISA Kit
别名: sIgA
实验类型: 竞争法
检测范围: 15.6-1000ng/mL
灵敏度: 7.7ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、唾液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
分泌型免疫球蛋白A(secretory immunoglobulin A,SIgA)是20世纪60年代初在外分泌液中发现的一种IgA抗体,主要存在于乳汁、胃肠液、呼吸道分泌液等外分泌液中。SIgA分子是由2个IgA单体(每个单体含2条轻链和2条重链)、1条J链和1条分泌片(secretory component,SC,为多聚免疫球蛋白受体的胞外裂解片段)构成的异源十聚体,为了与血清IgA单体相区别而被命名为SIgA。SIgA是外分泌液中存在的一种主要抗体,是呼吸道、消化道、泌尿生殖道等抵御病原体及有害物质的第一道免疫防线,是机体黏膜免疫最重要的抗体。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的sIgA, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
0.19
0.31
0.55
0.97
1.38
1.96
2.52
3.12
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠sIgA , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
80.8-101.0
96.90
血浆(n=8)
92.0-106.6
101.40
细胞培养上清(n=8)
95.0-108.3
105.90
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠sIgA , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.9-95.4
91.40
87.8-96.3
93.30
90.3-110.2
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.2-104.4
93.30
86.7-108.1
98.30
105.5-115.4
111.10
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