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信号通路
英文名称: Rat Ghrelin (Ghrelin) ELISA Kit
别名: Ghrelin
实验类型: 竞争法
检测范围: 6.25-400pg/mL
灵敏度: 3.5pg/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
饥饿素(Ghrelin,GHRL)是一种由胃肠道,特别是胃的肠道内分泌细胞产生的激素,它能增加食物摄入。饥饿时,血液中的饥饿素水平在餐前最高,餐后恢复到较低水平。饥饿素可能通过增加胃肠蠕动和胃酸分泌来帮助准备食物的摄入。饥饿素激活垂体前叶和下丘脑弓状核的细胞,包括启动食欲的神经肽Y神经元。饥饿素刺激具有特定受体的大脑结构--生长激素分泌物受体1A(GHSR-1A)。GHRL基因产生的mRNA有四个外显子。产生五个产物:第一个是117个氨基酸的前ghrelin。它与promotilin同源;两者都是motilin家族的成员。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠饥饿素(Ghrelin)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠饥饿素(Ghrelin)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的Ghrelin, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
400
200
100
50
25
12.5
6.25
0
OD值
0.15
0.29
0.41
0.7
1.03
1.3
1.63
1.78
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠Ghrelin , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.0-101.9
96.40
血浆(n=8)
92.6-105.2
101.90
细胞培养上清(n=8)
97.7-108.8
105.70
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠Ghrelin , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.3-95.3
91.90
88.0-96.3
93.10
90.7-110.5
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.1-104.7
93.90
87.6-108.8
98.70
105.2-115.9
110.70
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