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信号通路
英文名称: Rat Trypsinogen Activation Peptide (TAP) ELISA Kit
别名: TAP
实验类型: 竞争法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.04ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
胰蛋白酶原激活肽(TAP)是胰蛋白酶原的裂解产物,随着酶原颗粒的激活释放到系统循环中。由于其分子量低,TAP在尿液中迅速排泄,在尿液和血清中都容易检测到。同样,羧肽酶B激活肽(CAPAP)是原羧肽酶B的一个多肽片段,原羧肽酶B是胰岛细胞中的一种大型细胞膜蛋白。TAP和CAPAP都是随着蛋白酶的激活而释放的。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的TAP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
0.19
0.24
0.31
0.55
0.97
1.38
1.96
2.52
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠TAP , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.1-101.2
96.80
血浆(n=8)
92.1-105.9
101.70
细胞培养上清(n=8)
97.1-107.3
104.30
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠TAP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.7-96.0
92.70
88.9-96.7
93.30
90.1-110.8
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.8-104.7
93.30
87.6-108.0
98.80
105.4-115.2
110.80
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