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信号通路
英文名称: Rat Alkaline Phosphatase (ALP) ELISA Kit
别名: ALP
实验类型: 竞争法
检测范围: 1.25-80ng/mL
灵敏度: 0.8ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
碱性磷酸酶（ALP, ALKP, ALPase, Alk Phos），或称碱性磷酸酶，是一种86千道尔顿的同源蛋白酶。每个单体含有五个半胱氨酸残基、两个锌原子和一个镁原子，对其催化功能至关重要，它在碱性pH环境下具有最佳的活性。ALP具有去磷酸化化合物的生理作用。这种酶在众多的生物体中被发现，包括原核生物和真核生物，具有相同的一般功能，但有不同的结构形式，适合它们的功能环境。碱性磷酸酶存在于大肠杆菌的周质空间。这种酶具有热稳定性，在高pH值下具有最大的活性。由于它在这些领域的广泛存在，它在血液中的浓度被诊断师用作生物标志物，帮助确定肝炎或骨质疏松症等诊断。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠碱性磷酸酶(ALP)抗原的微孔中，依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠碱性磷酸酶(ALP)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的ALP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
80
40
20
10
5
2.5
1.25
0
OD值
0.216
0.298
0.417
0.669
0.955
1.405
1.79
1.865
校正OD 值
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的大鼠ALP , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.1-103.5
98.30
血浆(n=8)
92.4-105.1
102.80
组织匀浆(n=8)
96.1-108.0
105.50
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠血清血浆组织匀浆中加入高浓度大鼠ALP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.5
91.90
88.1-98.2
95.90
90.0-110.5
95.50
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.3
94.70
87.3-108.7
98.60
105.6-115.2
108.30
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