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信号通路
英文名称: Rat Gonadotropin Releasing Hormone (GnRH) ELISA Kit
别名: GnRH
实验类型: 竞争法
检测范围: 15.62-1000pg/mL
灵敏度: 9.35pg/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
促性腺激素释放激素(GnRH)是一种释放激素,负责从垂体前叶释放卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)。它是由下丘脑内的GnRH神经元合成和释放的一种滋生肽激素。该肽属于促性腺激素释放激素家族。它构成了下丘脑-垂体-性腺轴的最初步骤。门静脉血将GnRH带到垂体,垂体含有促性腺激素细胞,GnRH激活其自身的受体--促性腺激素释放激素受体(GnRHR),这是一个七跨膜的G蛋白偶联受体,刺激磷酸肌肽磷脂酶C的β异构体,进而调动钙和蛋白激酶C。这导致参与合成和分泌促性腺激素LH和FSH的蛋白质的激活。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠促性腺激素释放激素(GnRH)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠促性腺激素释放激素(GnRH)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的GnRH, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.25
15.62
0
OD值
0.188
0.27
0.389
0.642
0.929
1.38
1.766
1.842
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠GnRH , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.6-101.9
96.90
血浆(n=8)
92.8-107.4
103.80
细胞培养上清(n=8)
97.3-108.7
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠GnRH , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.8-95.8
91.40
86.2-96.7
91.20
90.7-110.1
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.1-104.0
93.80
87.6-108.0
98.70
105.8-115.6
110.10
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