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信号通路
英文名称: Rat Beta-Endorphin (b-EP) ELISA Kit
别名: β-EP
实验类型: 竞争法
检测范围: 15.62-1000pg/mL
灵敏度: 4.35pg/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
β-内啡肽或β-内啡肽是一种内源性阿片类神经肽和肽类激素,在中枢神经系统和外周神经系统的某些神经元中产生。β-内啡肽存在于下丘脑的神经元,以及垂体的神经元。它来源于β-促肾上腺皮质激素,后者在垂体中由一个较大的多肽前体--原肾上腺皮质激素(POMC)产生。POMC被裂解为两种神经肽,即促肾上腺皮质激素(ACTH)和β-促肾上腺皮质激素。 然后,β-内啡肽的形成是β-促脂素C端区域裂解的结果,产生一个31个氨基酸长的神经肽,具有α-螺旋二级结构。然而,POMC也产生其他肽类激素,包括α-和γ-黑素细胞刺激素(MSH),是由被称为原激素转化酶的内部酶在细胞内加工产生的。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠β-内啡肽(β-EP)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠β-内啡肽(β-EP)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的β-EP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.62
0
OD值
0.216
0.298
0.417
0.669
0.955
1.405
1.79
1.865
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠β-EP , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.2-101.1
96.40
血浆(n=8)
92.9-105.0
101.90
细胞培养上清(n=8)
97.8-108.7
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠β-EP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.7-95.6
91.50
88.5-96.2
93.50
90.1-110.6
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.0-104.9
93.30
87.7-108.1
98.60
105.0-115.2
110.30
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