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信号通路
英文名称: Rat 5-Hydroxytryptamine (5-HT) ELISA Kit
别名: 5-HT
实验类型: 竞争法
检测范围: 3.12-200ng/mL
灵敏度: 1.55ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆
隐藏域元素占位
详细信息
简介
5-羟色胺是一种吲哚衍生物,简称 5-HT,化学式为 C10H12N2O,分子量为 176.22。5-羟色胺最早是从血清中发现的,又名血清素,广泛存在于哺乳动物组织中,特别在大脑皮层质及神经突触内含量很高,它也是一种抑制性神经递质。5-羟色胺能与酸作用生成结晶盐。5-羟色胺在脑组织中的浓度较高,它是调节神经活动的一种重要物质。有些机体组织当受到某些药物作用时,可以释放出 5-羟色胺,例如一个利血平分子可以使受作用的组织释放出几百个 5-羟色胺分子,因而产生利血平的一系列生理作用。作为自体活性物质,约 90%合成和分布于肠嗜铬细胞,通常与 ATP 等物质一起储存于细胞颗粒内。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠5羟色胺(5-HT)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠5羟色胺(5-HT)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的5-HT, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
0.216
0.298
0.417
0.669
0.955
1.405
1.79
1.865
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠5-HT , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.9-101.7
96.60
血浆(n=8)
92.9-105.7
101.90
细胞培养上清(n=8)
97.8-108.2
105.30
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠5-HT , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.0-95.5
91.50
88.5-96.4
93.90
90.2-110.1
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.0-104.2
93.80
87.8-108.4
98.20
105.6-115.8
110.60
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