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信号通路
英文名称: Rat 25-OH-VD ELISA Kit
别名: 25-OH-VD
实验类型: 竞争法
检测范围: 3.12-200ng/mL
灵敏度: 1.4ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
25 羟基维生素 D(25-OH-VD)是维生素 D 在体内的主要存在形式。维生素 D 主要通过日照条件下皮肤合成,少部分可经饮食获得。维生素 D 为类固醇衍 生物,属脂溶性维生素,为环戊烷多氢菲类化合物。维生素 D 不仅仅影响钙 磷代谢,而且具有广泛的生理作用,是维持细胞生长和发育的必不可少的物 质,与多种疾病密切相关。维生素 D 在肝脏中通过羟基化作用转化成 25-羟 基维生素 D(25-OH-VD),然后在肾脏中转换为具有活性的 1,25-二羟基 维生素 D。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠25羟基维生素D(25-OH-VD)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠25羟基维生素D(25-OH-VD)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的25-OH-VD, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
0.216
0.298
0.417
0.669
0.955
1.405
1.79
1.865
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠25-OH-VD , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.4-101.7
96.70
血浆(n=8)
92.0-105.9
101.10
细胞培养上清(n=8)
97.9-108.2
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠25-OH-VD , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.4-95.3
91.70
88.7-96.7
93.70
90.2-110.5
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.4-104.2
93.10
87.9-108.4
98.70
105.7-115.5
110.10
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