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信号通路
英文名称: Guinea Pig Insulin (INS) ELISA Kit
别名: INS
实验类型: 竞争法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.06ng/mL
种属: 豚鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
胰岛素(INS)是一种由胰岛β细胞产生的肽类激素,由 INS 基因编码。它 被 认为是体内主要的合成代谢激素。它通过促进血液中的葡萄糖被肝脏、脂 肪 和骨骼肌细胞吸收而调节碳水化合物、脂肪和蛋白质的代谢。在这些组织 中,吸收的葡萄糖要么通过糖化作用转化为糖原,要么通过脂肪生成作用转 化为脂肪(甘油三酯),或者在肝脏的情况下,两者都转化为糖原。血液中 高浓度的胰岛素会强烈抑制肝脏的葡萄糖生产和分泌。循环中的胰岛素还影 响各种组织中蛋白质的合成。因此,它是一种同化激素,促进血液中的小分 子转化为细胞内的大分子。血液中的低胰岛素水平具有相反的效果,它促进 广泛的分解代谢,特别是储备的身体脂肪。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有豚鼠胰岛素(INS)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的豚鼠胰岛素(INS)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中豚鼠的INS, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
0.216
0.298
0.417
0.669
0.955
1.405
1.79
1.865
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康豚鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的豚鼠INS , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.3-101.1
96.50
血浆(n=8)
92.4-105.7
102.40
细胞培养上清(n=8)
96.5-108.5
105.70
线性稀释:分别在选取的4份健康豚鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度豚鼠INS , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.1
91.40
88.8-96.6
93.80
90.9-110.8
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.1
94.90
87.0-108.8
98.30
105.9-115.5
108.10
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