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信号通路
英文名称: General Vitamin B12(VB12)ELISA Kit
别名: VB12
实验类型: 竞争法
检测范围: 78-5000pg/mL
灵敏度: 38.5pg/mL
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
维生素 B12,也被称为钴胺,是一种参与新陈代谢的水溶性维生素。它是 DNA 合成、脂肪酸和氨基酸代谢的辅助因子。它在神经系统的正常功能中通过其 在髓鞘合成中的作用非常重要,并在骨髓中红细胞的成熟中发挥重要作用。 在发达国家,维生素 B12 缺乏的最常见原因是由于胃内因子(IF)的丧失而 导致的吸收障碍,而胃内因子必须与食物来源的 B12 结合才能吸收。第二个 主要原因是与年龄有关的胃酸分泌减少(失水症),因为胃酸暴露会释放与 蛋白质结合的维生素。出于同样的原因,长期接受抗酸剂治疗、使用质子泵 抑制剂、H2 受体阻滞剂或其他抗酸剂的通用种属风险增加。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有维生素B12(VB12)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的维生素B12(VB12)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中的VB12, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
5000
2500
1250
625
312
156
78
0
OD值
0.216
0.298
0.417
0.669
0.955
1.405
1.79
1.865
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的VB12 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.1-101.5
96.50
血浆(n=8)
93.8-105.5
101.50
细胞培养上清(n=8)
97.3-108.7
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康血清血浆细胞培养上清中加入高浓度VB12 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.7-95.0
91.30
88.8-96.2
93.70
90.7-110.8
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.2-104.4
93.10
87.6-108.1
98.70
105.5-115.8
110.30
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