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信号通路
英文名称: General Cyclic adenosine monophosphate(cAMP)ELISA Kit
别名: cAMP
实验类型: 竞争法
检测范围: 3.12-200ng/mL
灵敏度: 1.4ng/mL
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
环磷酸腺苷(cAMP)是在许多生物过程中很重要的第二信使。cAMP 是三磷酸 腺苷(ATP)的衍生物,在许多不同的生物体中用于细胞内信号转导,如将 胰高血糖素和肾上腺素等不能通过质膜的激素的作用转移到细胞中。它不应 与 5'-AMP 激活的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase)相混淆。它 还参与了蛋白激酶的激活。此外,cAMP 结合并调节离子通道的功能,如 HCN 通道和其他一些环核苷酸结合蛋白,如 Epac1 和 RAPGEF2。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有环磷酸腺苷(cAMP)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的环磷酸腺苷(cAMP)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中的cAMP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
0.216
0.298
0.417
0.669
0.955
1.405
1.79
1.865
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的cAMP , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.0-101.6
96.60
血浆(n=8)
92.4-105.7
101.20
细胞培养上清(n=8)
97.2-108.5
105.80
线性稀释:分别在选取的4份健康血清血浆细胞培养上清中加入高浓度cAMP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.3-95.8
91.20
88.5-96.3
93.30
90.9-110.1
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.6-105.7
93.70
97.0-108.0
98.60
105.6-115.2
110.80
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