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信号通路
英文名称: Pig Ghrelin (GHRL) ELISA Kit
别名: GHRL
实验类型: 竞争法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.06ng/mL
种属: 猪
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
饥饿素(Ghrelin)是由胃肠道,特别是胃的肠道内分泌细胞产生的一种激素,通常被称为"饥饿激素",因为它能增加进食的动力。Ghrelin 激活垂体前叶和下丘脑弓状核的细胞,包括启动食欲的神经肽 Y 神经元。Ghrelin 刺激具有特定受体的大脑结构--生长激素分泌受体 1A(GHSR-1A)。Ghrelin 还参与调节奖励认知、学习和记忆、睡眠-觉醒周期、味觉、奖励行为和葡萄糖代谢。GHRL 基因产生的 mRNA 有四个外显子。产生五个产物:第一个是 117 个氨基酸的前促性腺激素。它与 promotilin 同源;两者都是 motilin 家族的成员。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有猪饥饿素(GHRL)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的猪饥饿素(GHRL)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中猪的GHRL, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
0.19
0.24
0.31
0.55
0.97
1.38
1.96
2.52
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康猪血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的猪GHRL , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.7-101.9
96.30
血浆(n=8)
92.1-105.6
101.40
细胞培养上清(n=8)
97.1-108.5
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康猪血清血浆细胞培养上清中加入高浓度猪GHRL , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.7-95.9
91.10
88.7-96.0
93.10
90.1-110.1
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.2-104.4
93.70
87.3-108.4
98.60
105.2-115.2
110.20
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