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信号通路
英文名称: Bovine estrogen (E) ELISA Kit
别名: E
实验类型: 竞争法
检测范围: 1.56-100pg/mL
灵敏度: 0.48pg/mL
种属: 牛
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
雌激素或雌性激素,是一类性激素。有三种主要的内源性雌激素具有雌激素 活性:雌酮(E1)、雌激素(E2)和雌三醇(E3)。雌激素是一种雌性激素, 是最有效和最普遍的。另一种称为雌酮(E4)的雌激素只在怀孕期间产生。 雌激素在所有脊椎动物和一些昆虫中都能合成,它们在脊椎动物和昆虫中的 存在表明,雌激素类性激素有一个古老的进化历史。像所有的类固醇激素一 样,雌激素很容易扩散穿过细胞膜。一旦进入细胞,它们就会与雌激素受体 (ERs)结合并激活,从而调节许多基因的表达。此外,雌激素还与快速信 号的膜雌激素受体(mERs)结合并激活,如 GPER(GPR30)。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有牛雌激素(E)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的牛雌激素(E)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中牛的E, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
0.216
0.298
0.417
0.669
0.955
1.405
1.79
1.865
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康牛血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的牛E , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.9-102.7
97.40
血浆(n=8)
92.3-105.1
101.50
细胞培养上清(n=8)
97.6-108.4
105.30
线性稀释:分别在选取的4份健康牛血清血浆细胞培养上清中加入高浓度牛E , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.1-97.5
92.70
88.6-96.2
93.40
90.2-110.8
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.7-104.6
93.20
87.6-108.1
98.80
105.3-115.6
110.40
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