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信号通路
英文名称: Bovine Alkaline Phosphatase (ALP) ELISA Kit
别名: ALP
实验类型: 竞争法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.071ng/mL
种属: 牛
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
碱性磷酸酶（ALP, ALKP, ALPase, Alk Phos）是一种 86 千道尔顿的同源蛋白酶。每个单体含有五个半胱氨酸残基、两个锌原子和一个镁原子，对其催化功能至关重要，它在碱性 pH 环境下具有最佳的活性。它具有去磷酸化化合物的生理作用。这种酶在众多的生物体中被发现，包括原核生物和真核生物，具有相同的一般功能，但有不同的结构形式，适合它们的功能环境。它存在于大肠杆菌的周质空间。这种酶具有热稳定性，在高 pH 值下具有最大的活性。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有牛碱性磷酸酶(ALP)抗原的微孔中，依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的牛碱性磷酸酶(ALP)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中牛的ALP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
0.188
0.27
0.389
0.642
0.929
1.38
1.766
1.842
校正OD 值
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康牛血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的牛ALP , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.9-101.3
96.50
血浆(n=8)
92.9-104.4
101.20
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.1
105.20
线性稀释：分别在选取的4份健康牛血清血浆细胞培养上清中加入高浓度牛ALP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.5-95.1
91.80
88.3-95.9
92.30
90.7-110.2
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.3
94.60
87.3-108.3
98.10
105.7-115.0
108.40
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