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信号通路
英文名称: Rabbit Insulin (INS) ELISA Kit
别名: INS
实验类型: 竞争法
检测范围: 31.2-2000pg/mL
灵敏度: 14.25pg/mL
种属: 兔
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
胰岛素是由胰岛β細胞受內源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的激素而分泌的一種蛋白质激素。胰岛素它通过促进血液中的葡萄糖被肝脏、脂肪和骨骼肌细胞吸收来调节碳水化合物、脂肪和蛋白质的代谢。 在这些组织中,吸收的葡萄糖要么通过糖化作用转化为糖原,要么通过脂肪生成作用转化为脂肪(甘油三酯),或者在肝脏的情况下,两者都转化为糖原。血液中高浓度的胰岛素会强烈抑制肝脏的葡萄糖生产和分泌。循环中的胰岛素还影响各种组织中蛋白质的合成。因此,它是一种同化激素,促进血液中的小分子转化为细胞内的大分子。血液中的低胰岛素水平具有相反的效果,它促进广泛的分解代谢,特别是储备的身体脂肪。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有兔胰岛素(INS)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的兔胰岛素(INS)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中兔的INS, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.2
0
OD值
0.216
0.298
0.417
0.669
0.955
1.405
1.79
1.865
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康兔血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的兔INS , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.3-101.8
96.10
血浆(n=8)
92.6-105.1
101.10
细胞培养上清(n=8)
97.2-108.3
104.20
线性稀释:分别在选取的4份健康兔血清血浆细胞培养上清中加入高浓度兔INS , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.4-95.9
91.70
88.1-96.1
93.90
90.9-111.5
96.10
1:04
范围
平均回收率
90.1-104.2
93.70
87.4-108.9
98.10
105.3-115.9
110.60
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