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信号通路
英文名称: Rabbit Cyclic Adenosine Monophosphate (cAMP) ELISA Kit
别名: cAMP
实验类型: 竞争法
检测范围: 3.12-200ng/mL
灵敏度: 1.6ng/mL
种属: 兔
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
环磷酸腺苷(cAMP)是在许多生物过程中很重要的第二信使。cAMP是三磷酸腺苷(ATP)的衍生物,在许多不同的生物体中用于细胞内信号转导,如将胰高血糖素和肾上腺素等不能通过质膜的激素的作用转移到细胞中。它不应与5'-AMP激活的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase)相混淆。它还参与了蛋白激酶的激活。此外,cAMP结合并调节离子通道的功能,如HCN通道和其他一些环核苷酸结合蛋白,如Epac1和RAPGEF2。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有兔环磷酸腺苷(cAMP)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的兔环磷酸腺苷(cAMP)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中兔的cAMP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
0.216
0.298
0.417
0.669
0.955
1.405
1.79
1.865
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康兔血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的兔cAMP , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.5-101.3
96.60
血浆(n=8)
92.6-105.6
101.50
细胞培养上清(n=8)
97.4-107.9
105.80
线性稀释:分别在选取的4份健康兔血清血浆细胞培养上清中加入高浓度兔cAMP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.9-95.5
91.30
88.9-96.4
93.20
90.2-110.0
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.9-104.6
93.90
87.6-107.4
98.30
105.4-115.2
110.20
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