产品服务
信号通路
英文名称: General Flag-tag (Flag-tag) ELISA Kit
别名: Flag-tag
实验类型: 竞争法
检测范围: 15.6-1000ng/mL
灵敏度: 6.2ng/mL
保存温度: 2-8℃
样本类型: 细胞裂解液、细胞培养上清或其它相关液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
FLAG 标签,或 FLAG 八肽,或 FLAG 表位,是一种多肽蛋白质标签,可以用重组 DNA 技术添加到蛋白质中,其序列图案为 DYKDDDDK(其中 D=天冬氨酸,Y=酪氨酸,K=赖氨酸)。它是最特异的标签之一,是一种通用种属工抗原,已经开发出特异的、高亲和力的单克隆抗体,因此可用于亲和层析法的蛋白质纯化,也可用于定位活细胞内的蛋白质。它已被用于分离重组的、过量表达的蛋白和宿主生物体表达的野生型蛋白。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有Flag标签(Flag-tag)抗原的微孔中,依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的Flag标签(Flag-tag)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中的Flag-tag, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
0.216
0.298
0.417
0.669
0.955
1.405
1.79
1.865
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的Flag-tag , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
细胞培养上清(n=8)
97.3-109.9
105.30
(n=8)
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康细胞培养上清中加入高浓度Flag-tag , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.2-95.2
91.10
1:04
范围
平均回收率
89.0-104.8
93.60
推荐产品
暂无数据


微信客服