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信号通路
英文名称: General Inositol 1, 4, 5 trisphosphate (IP3) ELISA KIT
别名: IP3
实验类型: 竞争法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.069ng/mL
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
1,4,5 三磷酸肌醇(IP3)是一种肌醇磷酸酯信号分子。它是由磷脂酶 C（PLC） 水解磷脂酰肌醇 4,5-二磷酸（PIP2）制成的，PIP2 是一种位于质膜的磷脂。 与二酰基甘油（DAG）一起，IP3 是一种第二信使分子，用于生物细胞的信 号转导。DAG 留在膜内，而 IP3 是可溶性的，并通过细胞扩散，在那里它与 它的受体结合，后者是位于内质网的钙通道。当 IP3 与其受体结合时，钙被 释放到细胞膜上，从而激活各种钙调节的细胞内信号。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有1,4,5三磷酸肌醇(IP3)抗原的微孔中，依次加入样本、标准品、Biotin标记的抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的1,4,5三磷酸肌醇(IP3)呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中的IP3, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
0.188
0.27
0.389
0.642
0.929
1.38
1.766
1.842
校正OD 值
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的IP3 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
81.1-101.2
96.70
血浆(n=8)
92.7-105.4
101.40
细胞培养上清(n=8)
97.7-108.5
105.30
线性稀释：分别在选取的4份健康血清血浆细胞培养上清中加入高浓度IP3 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
83.6-95.4
91.90
88.7-95.9
93.10
90.2-110.2
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.4-104.3
93.60
87.9-107.8
98.30
105.6-115.4
110.20
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