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信号通路
英文名称: Monkey Perforin 1 (PF1) ELISA KIT
别名: PF1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.06ng/mL
种属: 猴
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
穿孔素(perforin,又称成孔蛋白pore-forming protein, PFP)是一种分子量为67kD,存在于细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和NK细胞胞质的细胞毒颗粒中的 糖蛋白,又称C9相关蛋白或溶细胞素（cytolysin),成熟的穿孔素分子由534个氨基酸残基组成,分子量为56-75kDa,IP为6.4,穿孔素分子中央部位170-390之间的氨基酸序列与C9328-560氨酸酸序列约有20% 同源性。当与靶细胞密切接触相互作用后,细胞可释放穿孔素。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有猴穿孔素1(PF1)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的猴穿孔素1(PF1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中猴的PF1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.7
2.05
1.31
0.77
0.49
0.3
0.21
0.1
校正OD 值
2.61
1.96
1.22
0.68
0.21
0.21
0.12
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康猴血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的猴PF1 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
82.5-102.8
98.90
血浆(n=8)
92.2-105.6
101.60
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康猴血清血浆中加入高浓度猴PF1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
82.1-98.5
93.90
87.6-96.3
93.60
1:04
范围
平均回收率
85.9-102.1
94.50
86.6-109.8
98.80
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