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信号通路
英文名称: Protein A(Protein A)
实验类型: -
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.152ng/mL
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
蛋白A(Protein A)是一种42kDa的表面蛋白,最初发现于金黄色葡萄球菌的细胞壁。它由spa基因编码,其调节受DNA拓扑结构、细胞渗透压和一个名为ArlS-ArlR的双组分系统控制。它由五个同源的Ig结合结构域组成,折叠成一个三螺旋束。每个结构域都能结合许多哺乳动物物种的蛋白质,最明显的是IgG。它与大多数免疫球蛋白的Fc区域内的重链结合。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有蛋白A(Protein A)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的蛋白A(Protein A)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中的, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.36
1.78
1.23
0.79
0.46
0.29
0.17
0.09
校正OD 值
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.3-101.8
96.20
血浆(n=8)
92.0-106.5
102.50
细胞培养上清(n=8)
96.5-108.1
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康血清血浆细胞培养上清中加入高浓度 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.4
91.50
88.1-96.1
93.70
90.9-110.1
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.5
94.40
87.9-108.7
98.20
105.2-115.6
108.50
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