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信号通路
英文名称: Human Complement Decay-accelerating Factor (DAF;CD55) ELISA KIT
别名: DAF;CD55
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.067ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
衰变加速因子又称CD55或DAF,是一种蛋白质,它调节着细胞表面的补体系统。它能识别C4b和C3b片段,这些片段是在激活C4(经典或凝集素途径)或C3(替代途径)时产生的。它与经典和凝集素途径的细胞相关C4b相互作用,干扰C2向C2b的转化,从而防止C4b2a C3转化酶的形成,它与替代途径的C3b相互作用,干扰D因子将B因子转化为Bb,从而防止替代途径的C3bBb C3转化酶的形成。因此,通过限制补体级联的扩增转化酶,DAF间接地阻止了膜攻击复合物的形成。这种糖蛋白广泛分布于造血细胞和非造血细胞中。它是克罗默血型系统的一个决定因素。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人衰变加速因子(DAF;CD55)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人衰变加速因子(DAF;CD55)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的DAF;CD55, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.42
1.55
0.88
0.49
0.29
0.19
0.14
0.07
校正OD 值
2.33
1.46
0.79
0.4
0.1
0.1
0.05
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人DAF;CD55 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-101.6
96.80
血浆(n=8)
92.1-105.9
102.90
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.9
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人DAF;CD55 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.2
91.90
88.9-96.0
93.50
90.9-110.8
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.6
94.90
87.7-108.7
98.30
105.3-115.2
108.30
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