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信号通路
英文名称: Mouse Soluble Cluster of Differentiation 40 Ligand (sCD40L) ELISA KIT
别名: sCD40L
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.08ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
可溶性 CD40 配体(sCD40L)包含在血小板颗粒中,因此它在血液中的存在是 血小板激活的一个标志。通过与存在于内皮细胞和平滑肌细胞上的 CD40 相 互作用,sCD40L 可能引发炎症介质的释放,导致基质金属蛋白酶的活性增 加,并激活凝血级联。sCD40L作为癌症诊断和进展的潜在生物标志物,越来越受到关注。sCD40L 在激活后从细胞表面脱落,进入循环并反映免疫细胞与肿瘤微环境之间的动态相互作用。新出现的证据表明,sCD40L 水平的改变可能与癌症发展、侵袭性和治疗反应相关,因此有望成为一种用于癌症检测和监测的非侵入性工具。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有小鼠可溶性CD40配体(sCD40L)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠可溶性CD40配体(sCD40L)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的sCD40L, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠sCD40L , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.2-101.0
96.20
血浆(n=8)
92.0-105.6
102.40
细胞培养上清(n=8)
96.2-108.4
105.60
线性稀释:分别在选取的4份健康小鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度小鼠sCD40L , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.3
91.30
88.9-96.6
93.30
90.5-110.6
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.5
94.50
87.5-108.2
98.30
105.6-115.3
108.70
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