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信号通路
英文名称: Human Interferon Gamma (IFN-γ) ELISA Kit
别名: IFN-γ
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.39-25pg/mL
灵敏度: 0.15pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
干扰素(IFN-γ,又称II型干扰素或免疫干扰素)是一种主要由T淋巴细胞和自然杀伤细胞产生的细胞因子。该蛋白与IFN-β或各种IFN-α家族蛋白没有明显的同源性。成熟的IFN-γ以非共价连接的同质体存在。人类IFN-γ具有高度的物种特异性,只在人类和灵长类细胞中具有生物活性。IFN-γ最初是基于其抗病毒活性而被定性的。该蛋白还发挥抗增殖、免疫调节和促进炎症的活性,因此在宿主防御机制中很重要。IFN-γ诱导细胞因子的产生,上调I类和II类MHC抗原、Fc受体和白细胞粘附分子的表达。它调节巨噬细胞的效应功能,影响异型转换并增强B细胞分泌免疫球蛋白的能力。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人γ干扰素(IFN-γ) 捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人γ干扰素(IFN-γ) 呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的IFN-γ, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0.78
0.39
0
OD值
2.36
1.78
1.23
0.79
0.46
0.29
0.17
0.09
校正OD 值
2.27
1.69
1.14
0.7
0.2
0.2
0.08
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人IFN-γ , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-101.7
96.50
血浆(n=8)
92.6-105.2
100.70
细胞培养上清(n=8)
96.4-110.3
107.90
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人IFN-γ , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
82.1-93.3
91.40
88.7-96.5
92.20
90.2-110.0
97.60
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.5
94.80
87.4-110.8
98.80
105.9-115.3
109.30
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