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信号通路
英文名称: Human Epididymis Protein 4 (HE4)
别名: HE4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.18ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
WAP四二硫化物核心域蛋白2,又称附睾蛋白4(HE4),是一种由WFDC2基因编码的蛋白。HE4是一个卵巢癌的肿瘤标志物,在150pmol/L的临界值时有80%的敏感性。该基因编码的蛋白是WFDC结构域家族的成员。WFDC结构域或WAP签名图案,包含八个半胱氨酸,在蛋白质的核心部位形成四个二硫键,在许多家族成员中发挥蛋白酶抑制剂的功能。该基因在肺上皮细胞中表达,也被发现在一些卵巢癌中表达。编码的蛋白是一种小型分泌蛋白,可能参与精子的成熟。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人附睾蛋白4 (HE4) 捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人附睾蛋白4 (HE4) 呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的HE4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.52
1.96
1.38
0.97
0.55
0.31
0.19
0.08
校正OD 值
2.43
1.87
1.29
0.88
0.22
0.22
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的人HE4 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.3-101.2
96.70
血浆(n=8)
92.6-105.2
102.90
组织匀浆(n=8)
96.5-108.2
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆组织匀浆中加入高浓度人HE4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.7
91.90
88.7-96.5
93.90
90.2-110.7
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.9
94.50
87.9-108.7
98.40
105.6-115.2
108.10
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