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信号通路
英文名称: Mouse Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 2A (CDKN2A；p16)
别名: CDKN2A
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.152ng/mL
种属: 小鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解物、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
周期素依赖性激酶抑制因子 2A，也被称为 CDKN2A，由 CDKN2A 基因编码。它在许多组织和细胞类型中无处不在。该基因编码两种蛋白质，包括 INK4家族成员 p16（或 p16INK4a）和 p14arf。两者都通过调节细胞周期来充当肿瘤抑制因子。p16 抑制细胞周期蛋白依赖性激酶 4 和 6（CDK4 和 CDK6），从而激活视网膜母细胞瘤（Rb）家族的蛋白质，从而阻断从 G1 到 S 期的遍历。p14ARF（在小鼠中称为 p19ARF）激活 p53 肿瘤抑制因子。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有小鼠周期素依赖性激酶 2A(CDKN2A)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的小鼠周期素依赖性激酶 2A(CDKN2A)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中小鼠的CDKN2A, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.36
1.78
1.23
0.79
0.46
0.29
0.17
0.09
校正OD 值
2.27
1.69
1.14
0.7
0.2
0.2
0.08
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康小鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的小鼠CDKN2A , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.9-101.5
96.90
细胞裂解液(n=8)
92.3-105.4
101.50
细胞培养上清(n=8)
96.5-110.4
107.80
线性稀释：分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度小鼠CDKN2A , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
82.8-93.8
91.30
88.9-96.3
92.60
90.0-110.1
97.60
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.8
94.10
87.9-110.4
98.20
105.1-115.8
107.70
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