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信号通路
英文名称: Human Melanoma differentiation-associated protein 5 (MDA5) ELISA Kit
别名: MDA5
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.2ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
MDA5（黑色素瘤分化相关蛋白5）是一种RIG-I类受体dsRNA螺旋酶，由IFIH1基因编码。MDA5是RIG-I类受体（RLR）家族的一部分，该家族还包括RIG-I和LGP2，并作为一种模式识别受体能够检测病毒。一般认为MDA5能识别长度超过2000nts的双链RNA（dsRNA），然而已经证明，虽然MDA5能检测并与细胞质dsRNA结合，它也能被由ssRNA和dsRNA组成的高分子量RNA复合物激活。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的MDA5, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.35
1.35
0.8
0.48
0.34
0.26
0.22
0.09
校正OD 值
2.26
1.26
0.71
0.39
0.17
0.17
0.13
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人MDA5 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
92.3-105.6
102.90
细胞裂解液(n=8)
96.8-108.0
105.80
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人MDA5 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
88.9-96.7
92.30
90.3-110.9
96.70
1:04
范围
平均回收率
87.3-108.2
98.90
105.1-115.6
108.40
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