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信号通路
英文名称: Human High mobility group box 1 (HMGB-1) ELISA Kit
别名: HMGB-1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 62.5-4000pg/mL
灵敏度: 31pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液及其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
高迁移率族蛋白B1,由HMGB1基因编码。 HMG-1属于高迁移率组,包含一个HMG-box结构域。与组蛋白一样,HMGB1是最重要的染色质蛋白之一。在细胞核中,HMGB1与核糖体、转录因子和组蛋白相互作用。它还与核糖体相互作用,使包装的DNA松动并重塑染色质,与核心组蛋白的接触改变了核糖体的结构。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的HMGB-1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
4000
2000
1000
500
250
125
62.5
0
OD值
2.45
1.88
1.46
1.13
0.76
0.49
0.38
0.08
校正OD 值
2.36
1.79
1.37
1.04
0.4
0.4
0.29
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的人HMGB-1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-101.0
96.10
血浆(n=8)
92.9-105.4
102.30
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆中加入高浓度人HMGB-1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.4
91.70
88.5-96.7
93.90
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.9
94.50
87.2-108.6
98.50
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