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信号通路
英文名称: Human Osteonectin (ON) ELISA Kit
别名: ON
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.25-2000ng/mL
灵敏度: 14.23ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
骨粘连蛋白(ON)也被称为富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)或基底膜蛋白40(BM-40),是一种在人类中由SPARC基因编码的蛋白质。骨粘连蛋白是一种40 kDa的酸性和富含半胱氨酸的糖蛋白,与钙结合,由一条多肽链组成,可分成4个结构域:氨基端富含谷氨酸区域附近的Ca2+结合域(域I)、富含半胱氨酸的域(域II)、亲水区域(域III)和羧基端区域的EF手图案(域IV)。它在骨形成过程中由成骨细胞分泌,启动矿化并促进矿物晶体形成。除了骨矿物质钙之外,骨粘连蛋白还对胶原蛋白显示出亲和力。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人骨粘连蛋白(ON)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人骨粘连蛋白(ON)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的ON, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.25
0
OD值
2.15
1.69
1.14
0.85
0.52
0.34
0.25
0.12
校正OD 值
2.06
1.6
1.05
0.76
0.25
0.25
0.16
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的人ON , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.7-101.5
96.50
血浆(n=8)
92.4-105.1
102.10
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆中加入高浓度人ON , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.0
91.10
88.0-96.6
93.80
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.2
94.60
87.4-108.5
98.50
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