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信号通路
英文名称: Human Osteopontin (OPN) ELISA Kit
别名: OPN
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.62-40ng/mL
灵敏度: 0.23ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
骨桥素(OPN),也称为骨桥蛋白或者骨唾液蛋白I(BSP-1或BNSP),早期T淋巴细胞激活因子,分泌磷蛋白1和抗立克次体,是由SPP1基因编码的蛋白质。它属于SIBLING蛋白,于1986年首次在成骨细胞中被发现。 Osteopontin的前缀“osteo”表示蛋白质在骨中表达,尽管其也在其他组织中表达。它由多种组织类型生物合成,包括心脏成纤维细胞,成骨细胞,骨细胞,成牙细胞,一些骨髓细胞,肥厚软骨细胞,树突状细胞,巨噬细胞,平滑肌,骨骼肌成肌,内皮细胞,内耳、脑、肾、蜕膜和胎盘中的骨外(非骨)细胞。它的合成受到骨化三醇(1,25-二羟基维生素D3)的刺激。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人骨桥素(OPN)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人骨桥素(OPN)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的OPN, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
40
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0
OD值
2.18
1.26
0.77
0.45
0.33
0.24
0.19
0.08
校正OD 值
2.09
1.17
0.68
0.36
0.15
0.15
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人OPN , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
86.0-101.5
96.50
血浆(n=8)
92.3-105.6
102.60
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.9
103.50
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人OPN , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.5
91.10
88.8-96.9
92.60
90.6-110.3
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.7
94.50
87.9-108.4
98.80
105.7-115.4
108.70
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