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信号通路
英文名称: Human Granzyme K (GZMK) ELISA Kit
别名: Gzms-K
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.25-2000pg/mL
灵敏度: 12.17pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
颗粒酶K是一种蛋白质,它是一组相关的丝氨酸蛋白酶的成员,来自细胞毒性淋巴细胞的细胞质颗粒。细胞溶解性T淋巴细胞(CTL)和自然杀伤性(NK)细胞具有识别、结合和裂解特定目标细胞的显著能力。它们被认为是通过裂解表面带有 "非自身 "抗原的细胞来保护它们的宿主,这些抗原通常是由细胞内病原体感染产生的肽或蛋白质。这里描述的蛋白质缺乏其他颗粒酶中存在的N-糖基化的共识序列。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人颗粒酶K(Gzms-K)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人颗粒酶K(Gzms-K)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的Gzms-K, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.25
0
OD值
2.56
1.45
0.8
0.48
0.33
0.23
0.2
0.08
校正OD 值
2.47
1.36
0.71
0.39
0.14
0.14
0.11
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人Gzms-K , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.5-101.6
96.60
血浆(n=8)
92.6-105.2
102.10
细胞裂解液(n=8)
96.4-108.7
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞裂解液中加入高浓度人Gzms-K , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
83.2-95.1
91.30
88.8-95.1
93.10
90.5-110.3
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.6
94.50
87.9-108.9
98.10
105.7-115.2
108.70
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