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信号通路
英文名称: Human Hedgehog Homolog, Sonic (SHH) ELISA Kit
别名: SHH
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 78.12-5000pg/mL
灵敏度: 31.27pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
音猬因子(SHH)是由SHH基因编码的一种蛋白质。这种信号分子是调节所有不同类型动物的胚胎形态发生的关键。SHH基因是刺猬基因家族的成员,有五种DNA序列改变或剪接变体。它位于第七号染色体上,启动音速刺猬蛋白的产生。这种蛋白向胚胎组织发送短程和远程信号,以调节发育。SHH控制器官发育和中枢神经系统、四肢、手指和身体其他许多部位的组织。音猬因子是一种形态原,它利用法旗模型所描述的浓度梯度来塑造发育中的胚胎。这种模型有一个非均匀分布的SHH分子,它根据浓度来支配不同的细胞的命运。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人音猬因子(SHH)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人音猬因子(SHH)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的SHH, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
5000
2500
1250
625
312.5
156.25
78.12
0
OD值
2.15
1.72
1.4
1
0.67
0.48
0.33
0.1
校正OD 值
2.06
1.63
1.31
0.91
0.39
0.39
0.24
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人SHH , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.6-101.2
96.70
细胞裂解液(n=8)
92.0-105.3
102.80
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人SHH , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.3
91.40
88.2-96.6
93.60
1:04
范围
平均回收率
89.3-102.4
94.50
87.3-108.8
98.10
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