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信号通路
英文名称: Human Connexin 43 (CX43) ELISA Kit
别名: CX43
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.074ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
间隙连接α-1蛋白(GJA1),也被称为连接蛋白43(Cx43),由6号染色体上的GJA1基因编码的蛋白质。作为一种连接蛋白,GJA1是间隙连接的一个组成部分,它使细胞间的间隙连接细胞间通讯(GJIC)能够调节细胞死亡、增殖和分化。由于其功能,GJA1与许多生物过程有关,包括肌肉收缩、胚胎发育、炎症和精子生成,以及疾病,包括眼球发育不良(ODDDD)、心脏畸形和癌症。GJA1是一个由382个氨基酸组成的43.0kDa的蛋白质。它含有一个长的C端尾巴,一个N端结构域和多个跨膜结构域。该蛋白四次穿过磷脂双分子层,使其C端和N端暴露在细胞质中。C端尾巴由50个氨基酸组成,包括翻译后修饰位点,以及转录因子、细胞骨架元素和其他蛋白的结合位点。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人间隙连接蛋白43(CX43)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人间隙连接蛋白43(CX43)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的CX43, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人CX43 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.1-101.7
96.70
细胞裂解液(n=8)
92.1-105.1
102.20
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人CX43 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.2
91.20
90.1-110.6
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.0
94.70
105.4-115.5
108.80
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