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信号通路
英文名称: Human Calmodulin (CAM) ELISA Kit
别名: CAM
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.06ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
钙调蛋白(CaM)是一种在所有真核细胞中表达的多功能中间钙结合信使蛋白。它是二级信使Ca2+的细胞内目标,Ca2+的结合是激活钙调蛋白的必要条件。一旦与Ca2+结合,钙调蛋白就会通过改变其与各种目标蛋白(如激酶或磷酸酶)的相互作用而作为钙信号转导途径的一部分。钙调蛋白是一种高度保守的小蛋白,有148个氨基酸长(16.7kDa)。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人钙调素(CAM)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人钙调素(CAM)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的CAM, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.32
1.93
1.31
0.85
0.51
0.39
0.28
0.1
校正OD 值
2.23
1.84
1.22
0.76
0.3
0.3
0.19
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的人CAM , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.8-101.9
96.20
血浆(n=8)
92.8-105.8
102.80
组织匀浆(n=8)
96.1-108.8
105.30
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆组织匀浆中加入高浓度人CAM , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.8
91.60
88.1-96.4
92.60
90.5-110.7
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.5
94.90
87.2-108.9
98.70
105.9-115.4
108.60
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